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1. Wymienic cytokiny Th1:
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IL-18, G-CSF, IL-2 (+IL-3; +IL-12; IFN-gamma)
Czego nie wykryjesz Elisa:
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limfocyty NK, CD3+, CD8+
Co robi owoalbumina:
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wycisza tło
W konkurencyjnej elisie:
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im wiecej przeciwcial tym mniej natezona barwa
Kompetycyjny test ELISA - metoda pośrednia
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1) płytka oplaszczona antygenem, wysycona2) inkubacja z mieszanina(surowica+monoklon. przec)3)II przeciwcialo przecciwko globulinie zwierzecia z ktorego pochodzilo przeciwc. monoklonalne
Do czego służy BSA ta bawola albumnia
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(bovine serum albumin) i służy do wyciszania tła reakcji
3. O cytokinkach hemopoetycznych
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G-CSF i erytropoetyna oraz M-CSF (+GM-CSF; SCF)
ostatnia reakcja ELISA - CHROMOGEN I NADTLENEK WODORU
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(to oksydaza chrzanowa rozkłada H2O2, a na uwidocznienie tej reakcji pozwala chromogen)
Czego nie wykryje ELISA:
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CD 3+
Jakim testem oznaczysz hapteny?
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ELISA konkurencyjna
Działanie sa sąsiednia komorke?
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parakrynne
Tetrametylobenzydyna jest:
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substratem
Co blokuje w ELISIE
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Kazeina i żelatyna
Czego nie oznaczamy ELISĄ:
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receptory komórkowe CD86+
Czym można wykryć hapteny
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kompetycyjny
Białka blokujące w ELISA
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owoalbumina i kazeina
Do czego wykorzystujemy ELISA:
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a. testy hormonalne b. wykrywanie antygenów c. Oznaczanie CEA i PSA
Cytokiny to coś tam o małej masie cząsteczkowej itd, zaznacz prawdę:
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głównie działają miejscowo ale mogą też działać na inne i odległe tkanki
Co opłaszcza podłoże w metodzie kanapkowej
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przeciwciala
Barwa Dab
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Barwa Dab -> brazowe, TMB -> niebieskie [a po zatrzymaniu reakcji żółte]
Synergistyczne sa
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IL4 i 5 [na pewno też IL-6 i IL-7 razem pobudzają limfopoezę silniej niż każda z osobna]
Zwiększanie absorbancji następuje w ELISA:
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a) kompetencyjnej z malą iloscią antygenu b) niekompetencyjnej pośredniej kanapkowej c) niekompetencyjnej bezpośredniej kanapkowej
W metodzie konkurencyjnej
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mała absorbancja oznacza dużo antygenu;
Th1 cytokiny:
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IL-2 i IL-12;
homogenna metoda
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jest w roztworze i ma małą czułość;
cytokiny
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glikoproteiny komórek jądrzastych, działanie głównie parakrynne
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